產(chǎn)品名稱：BD Leuko Act Cktl 細胞因子刺激劑

產(chǎn)品貨號:  550583

產(chǎn)品規(guī)格：200 µL

產(chǎn)品品牌：BD

產(chǎn)品簡介：

通過細胞內(nèi)染色檢測細胞內(nèi)細胞因子積累的最關(guān)鍵步驟是分離和激活細胞群，以誘導(dǎo)產(chǎn)生感興趣的細胞因子。如果沒有適當激活的產(chǎn)生細胞因子的細胞，在蛋白質(zhì)運輸抑制劑的存在下培養(yǎng)，檢測細胞因子在細胞內(nèi)積聚的能力在大多數(shù)情況下會嚴重受損。各種體外方法已經(jīng)報道刺激細胞產(chǎn)生細胞因子。多克隆激活劑在誘導(dǎo)產(chǎn)生細胞因子的細胞方面特別有用。這些激活劑包括以下:炮豆蛋白A、脂多糖、佛波酯加鈣離子載體或離子霉素、植物血凝素、葡萄球菌腸毒素B和針對TCR/CD3復(fù)合物亞單位的單克隆抗體(含或不含針對共刺激受體的抗體，如CD28)。

PMA (phorbol 12-Myristate 13-Acetate)一種鈣離子載體(Ionomycin)和蛋白質(zhì)運輸抑制劑。這種混合物可能被用來誘導(dǎo)來自T細胞的主要細胞因子反應(yīng)。使用這種雞尾酒刺激細胞會產(chǎn)生細胞因子，這些細胞因子位于細胞因子產(chǎn)生細胞的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中。這種細胞因子的定位是由蛋白質(zhì)運輸抑制劑成分Brefeldin A引起的，它可以阻斷細胞內(nèi)蛋白質(zhì)運輸過程。細胞中細胞因子蛋白水平的增加，增強了免疫熒光染色和流式細胞分析對細胞因子產(chǎn)生細胞的檢測能力。每100µL小瓶的內(nèi)容物足以處理多達50 mL的細胞培養(yǎng)物(在~10^6細胞/mL);因此可刺激≥5 × 10^7細胞。

準備和存儲

在使用前將產(chǎn)品儲存在-80°C或長期存儲庫存溶液。

推薦的試驗程序

使用GolgiPlug:在水浴中在37°C快速解凍雞尾酒，每1 mL細胞培養(yǎng)(例如，~10^6細胞/mL)加入2µL的雞尾酒，并*混合。將培養(yǎng)物置于37°C濕化CO2培養(yǎng)箱中4-6小時。

活化后，用FACS染色緩沖液(如 Pharmingen染色緩沖液、胎牛血清，用于抗體染色。

用白細胞激活雞尾酒治療受刺激的細胞4至6小時，BD GolgiPlug通過免疫熒光染色顯著提高檢測細胞因子產(chǎn)生細胞的能力。推薦GolgiPlug的白細胞激活雞尾酒在細胞培養(yǎng)中保存時間不超過12小時。

GolgiPlug被發(fā)現(xiàn)對細胞內(nèi)細胞因子染色有不同的影響，是時間、激活劑和細胞因子依賴的，因此研究人員可能根據(jù)經(jīng)驗確定激活細胞超過4-6小時的需要。

產(chǎn)品訂購信息：

貨號             名稱                                             規(guī)格

550583  Leuko Act Cktl 細胞因子刺激劑    2×100 µL

產(chǎn)品名稱：BD Leuko Act Cktl 細胞因子刺激劑

產(chǎn)品貨號:  550583

關(guān)于公司：

BD 多色流式細胞術(shù)提供了各種目標細胞亞群的快速、多參數(shù)分析。其應(yīng)用包括免疫學、免疫腫瘤學、病毒學、免疫監(jiān)測等。BD Biosciences開發(fā)了跨越每條激光線的創(chuàng)新染料，以提供多色實驗方案設(shè)計靈活性和全面的偶聯(lián)抗體組合，幫助深度表征表面、細胞內(nèi)或分泌標記物。從簡單到復(fù)雜研究應(yīng)用的流式細胞儀和分選儀，到廣泛的試劑選擇和教育資源、工具和方案的全面收集，我們支持您有效地管理多色流式細胞儀工作流程。

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